諾如病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒

廣州健侖生物科技有限公司

主要用途：用于檢測(cè)糞便標(biāo)本中的諾如病毒抗原，以支持諾如病毒感染的診斷。

產(chǎn)品規(guī)格：20T/盒

存儲(chǔ)條件：2-30℃

諾如病毒熒光PCR檢測(cè)試劑盒

（一）病毒結(jié)構(gòu)
諾如病毒為無(wú)包膜單股正鏈RNA病毒，病毒粒子直徑約27-40nm，基因組全長(zhǎng)約7.5-7.7kb，分為三個(gè)開放閱讀框(Open Reading Frames, ORFs)，兩端是5'和3'非翻譯區(qū)（Untranslated region, UTR），3'末端有多聚腺苷酸尾（PolyA）。ORF1編碼一個(gè)聚蛋白，翻譯后被裂解為與復(fù)制相關(guān)的7個(gè)非結(jié)構(gòu)蛋白（Non-structural polyprotein），其中包括RNA依賴的RNA聚合酶（RNA dependent RNA polymerase, RdRp）。ORF2和ORF3 分別編碼主要結(jié)構(gòu)蛋白（VP1）和次要結(jié)構(gòu)蛋白（VP2）。病毒衣殼由180個(gè)VP1和幾個(gè)VP2分子構(gòu)成，180 個(gè)衣殼蛋白首先構(gòu)成90 個(gè)二聚體，然后形成二十面體對(duì)稱的病毒粒子。根據(jù)蛋白在衣殼中的位置，每個(gè)衣殼蛋白可分為兩個(gè)主要區(qū)域，分別為殼區(qū)（Shell domain，S 區(qū)）和突出區(qū)（Protruding domain，P區(qū)），二者之間是由8 個(gè)氨基酸組成的鉸鏈區(qū)（Hinge）連接。S 區(qū)由衣殼蛋白的前225 個(gè)氨基酸組成，形成病毒內(nèi)殼，圍繞病毒RNA。P 區(qū)由剩余的氨基酸組成，進(jìn)一步分為兩個(gè)亞區(qū)P1 區(qū)和P2 區(qū)。P 區(qū)通過(guò)二聚體相互作用增加衣殼穩(wěn)定性并形成電鏡下可見的病毒粒子突出端。P2 區(qū)高度變異，包含潛在的抗原中和位點(diǎn)和受體組織血型抗原（histoblood group antigens，HBGAs）識(shí)別位點(diǎn)。VP2位于病毒粒子內(nèi)部，被認(rèn)為參與衣殼聚集。

【產(chǎn)品介紹】

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

在驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中，用諾如病毒抗原快速檢測(cè)試劑卡（免疫層析法）檢測(cè)113 例糞便樣本。樣本

從胃腸炎患者的糞便中采集，既有散發(fā)病例，也有爆發(fā)病例。樣本收集于2007-2008 年的冬季，在德國(guó)漢堡的城市地區(qū)采集。在當(dāng)?shù)氐男l(wèi)生研究所，用RT-PCR 的方法檢測(cè)新鮮的樣本后，將樣本凍存。2008 年7 月，將冰凍的樣本融化后，在與之前相同的實(shí)驗(yàn)室，用諾如病毒抗原快速檢測(cè)試劑卡（免疫層析法）和已上市的諾如病毒抗原檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法），同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。

【注意事項(xiàng)】

1. 僅用于體外診斷。

2. 實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)的人員操作。必須嚴(yán)格按照醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度操作。

3. 產(chǎn)品操作時(shí)必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

4. 樣品稀釋緩沖液中含有Kathon CG 作為防腐劑，此物質(zhì)不能接觸皮膚或粘膜。

5. 樣本和試劑不可以用嘴吸取。

6. 樣本和試劑避免接觸受傷的皮膚或者粘膜。

7. 處理樣本時(shí)應(yīng)該戴一次性手套，完成試驗(yàn)后要洗手。

8. 禁止在樣本和試劑實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)吸煙、吃東西或喝水。

9. 所有試劑和材料如果接觸有潛在感染性的樣本，應(yīng)與樣本一樣，立即用適當(dāng)?shù)南緞ㄈ纾?/span>

次氯酸鈉）或者高壓高溫121℃至少1 小時(shí)處理。

10. 諾如病毒抗原快速檢測(cè)試劑卡（免疫層析法）必須在效期內(nèi)使用。所有的試劑都被調(diào)整

為zui適宜的活性狀態(tài)。稀釋或改變這些試劑將減少其活性。如果不按照說(shuō)明中的時(shí)

間和溫度進(jìn)行操作，將會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

11. 不同批號(hào)的諾如病毒抗原快速檢測(cè)試劑卡（免疫層析法）試劑盒中的試劑不可以混用。

12. 試劑和樣本必須避免微生物的污染，否則將會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

13. 吸取每個(gè)樣本時(shí)，必須使用不同的吸管，以防止交叉污染及錯(cuò)誤結(jié)果

14. 每個(gè)檢測(cè)卡只可使用一次

【注意事項(xiàng)】

1. 僅用于體外診斷。

2. 實(shí)驗(yàn)必須由經(jīng)過(guò)專業(yè)培訓(xùn)的人員操作。必須嚴(yán)格按照醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度操作。

3. 產(chǎn)品操作時(shí)必須嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。

4. 樣品稀釋緩沖液中含有Kathon CG 作為防腐劑，此物質(zhì)不能接觸皮膚或粘膜。

5. 樣本和試劑不可以用嘴吸取。

6. 樣本和試劑避免接觸受傷的皮膚或者粘膜。

7. 處理樣本時(shí)應(yīng)該戴一次性手套，完成試驗(yàn)后要洗手。

8. 禁止在樣本和試劑實(shí)驗(yàn)區(qū)域內(nèi)吸煙、吃東西或喝水。

9. 所有試劑和材料如果接觸有潛在感染性的樣本，應(yīng)與樣本一樣，立即用適當(dāng)?shù)南緞ㄈ纾?/span>

次氯酸鈉）或者高壓高溫121℃至少1 小時(shí)處理。

10. 諾如病毒抗原快速檢測(cè)試劑卡（免疫層析法）必須在效期內(nèi)使用。所有的試劑都被調(diào)整

為zui適宜的活性狀態(tài)。稀釋或改變這些試劑將減少其活性。如果不按照說(shuō)明中的時(shí)

間和溫度進(jìn)行操作，將會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

11. 不同批號(hào)的諾如病毒抗原快速檢測(cè)試劑卡（免疫層析法）試劑盒中的試劑不可以混用。

12. 試劑和樣本必須避免微生物的污染，否則將會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

13. 吸取每個(gè)樣本時(shí)，必須使用不同的吸管，以防止交叉污染及錯(cuò)誤結(jié)果

14. 每個(gè)檢測(cè)卡只可使用一次

我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒：登革熱、瘧疾、西尼羅河、立克次體、無(wú)形體、蜱蟲、恙蟲、利什曼原蟲、RK39、漢坦病毒、深林腦炎、流感、A鏈球菌、合胞病毒、腮病毒、乙腦、寨卡、黃熱病、基孔肯雅熱、克錐蟲病、違禁品濫用、肺炎球菌、軍團(tuán)菌、化妝品檢測(cè)、食品安全檢測(cè)等試劑盒以及日本生研細(xì)菌分型診斷血清、德國(guó)SiFin診斷血清、丹麥SSI診斷血清等產(chǎn)品。

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【企業(yè)文化】

系從小牛腸粘膜和大腸桿菌中提取，由多個(gè)同功酶組成。它們的底物種類很多，常用者為硝基苯磷酸鹽，廉價(jià)無(wú)毒性。酶解產(chǎn)物呈黃色，可溶，zui大吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反應(yīng)系統(tǒng)中，37℃1分鐘水解1μg磷酸苯二鈉為一個(gè)單位。

酶與抗體交聯(lián)，常用戊二醛法和過(guò)碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過(guò)碘酸鈉法簡(jiǎn)單易行，標(biāo)記效果好，特別適用于實(shí)驗(yàn)室的小批量制備。其標(biāo)記程序?yàn)椋簩?μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過(guò)碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘 ， 取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml，混勻并裝透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時(shí)（或過(guò)夜）使之結(jié)合，然后吸出，加硼氫化鈉（NaBH4）溶液（ 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小時(shí)，將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液，置4℃冰箱30分鐘后離心，將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中，并對(duì)之透析過(guò)夜（4℃），次日離心除去不溶物，即得到酶標(biāo)抗體，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，進(jìn)行測(cè)定后，冷凍干燥或低溫保存。

It is extracted from calf intestinal mucosa and E. coli and consists of multiple isoenzymes. There are many types of their substrates, commonly used nitrophenyl phosphate, cheap and non-toxic. The enzymolysis product was yellow and soluble with a maximum absorption at 400 nm. The activity of the enzyme was determined by hydrolyzing 1 μg of disodium phosphate in one unit at 37°C for 1 minute in a pH 10 reaction system.

Cross-linking enzymes and antibodies, commonly used glutaraldehyde and periodate oxidation. The modified sodium periodate method established by Guo Chunxiang with HRP-labeled antibody is simple and effective, and has good labeling effect. It is particularly suitable for small batch preparation in the laboratory. The labeling procedure is as follows: Dissolve 5μg HRP in 0.5ml distilled water, add freshly prepared 0.06mol/L sodium periodate (NaIO4) aqueous solution 0.5ml, mix and store at 4°C for 30 minutes, take out and add 0.16mol/L Aqueous solution of ethylene glycol 0.5ml, after standing at room temperature for 30 minutes, add 1ml of aqueous solution containing 5g (g of purified antibody), mix and put in dialysis bag, and carbonate buffer at 0.05mol/L, pH 9.5 in a refrigerator at 4°C The solution was combined and dialyzed by dialysis for 6 hours (or overnight), and then aspirated. A solution of sodium borohydride (NaBH4) (0.2 ml, 5 (g/ml)) was added and the mixture was added to the mixture at 4C for 2 hours. An equal volume of saturated ammonium sulfate solution was placed in a refrigerator at 4°C for 30 minutes and centrifuged. The resulting precipitate was dissolved in a small amount of 0.02 mol/L, pH 7.4 PBS, and dialyzed overnight (4°C). The insoluble material was removed by centrifugation the next day. That is, the enzyme-labeled antibody was obtained and diluted with 0.02 mol/L, pH 7.4 PBS to 5 ml, and then measured and freeze-dried or cryopreserved.